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小麦与不同加工精度小麦粉中 呕吐毒素含量的相关性实验——徐留安

发布者:admin  时间:2020-03-06 09:23  浏览:�?/p>

    摘要以自然污染呕吐毒素(DON)程度不同的小麦为材料,通过实验室磨粉机制成不同加工精度的小麦粉,检测其中DON的含量,并与全麦粉作为对比,分析小麦与不同加工精度小麦粉中呕吐毒素含量的相关性。结果表明随着小麦加工精度的提高,出粉率下降,小麦粉中呕吐毒素逐渐降低。表明DON毒素主要存在小麦的表层和麸皮中而在胚乳中较少。
    关键词: 小麦  呕吐毒素  磨粉  出粉率
    呕吐毒素(vomitoxin),又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),化学名为3α, 7α, 15一三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮,属单端孢霉烯族化合物。作为一种常见的真菌毒素,呕吐毒素在自然界中广泛存在于小麦等粮谷农作物中,特别在中国温湿带地区,小麦在收获季节极易感染小麦赤霉病,致使小麦呕吐毒素含量超标。人和动物大量摄入DON会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状,严重时损害造血系统造成死亡。1998 年,在国际癌症研究机构公布的评价报告中,呕吐毒素被列为 3 类致癌物。目前我国相关国家标准规定,小麦及其制品等农产品、食品中呕吐毒素含量不得超过1 mg/kg。2018年由于受阴雨天气的影响,中国大部分小麦呕吐毒素含量超标,而粮库及面粉加工企业执行严格的呕吐毒素限量指标,致使小麦市场出现很大的波动。小麦经去杂、润麦、磨粉等工序去除麸皮得到小麦粉,因此小麦与小麦粉中呕吐毒素的含量会有所不同,并且存在一定的相关性。本实验就不同呕吐毒素含量的小麦进行不同程度的磨粉加工处理,分析其呕吐毒素含量的变化和分布情况,从而为污染呕吐毒素小麦的合理利用提供参考。
    1  实验材料设备
    1.1材料与试剂
    不同呕吐毒素含量的小麦样品 4份,每份样品2kg。呕吐毒素提取液,DON标准样品,DON稀释缓冲液。
    1.2 仪器与设备
    FS粉碎机:杭州天成光电有限公司,ALMB 磨粉机:布勒粮食检验仪器无锡有限公司,ALMB粉筛:布勒粮食检验仪器无锡有限公司 呕吐毒素检测系统: 美国Charm Rosa检测系统。 
    2试验检测方法
    2.1样品的处理
    将每个样品(2kg)平分四等分,每份500g,一份去除杂质用粉碎成全麦粉,另三份小麦按照按照小麦实验制粉要求,将小麦杂质挑出,测定其含水量,根据小麦含水量调节小麦入磨水分到15%,充分搅匀,放入密封袋中润麦24h.以实验室磨粉机磨粉,磨粉环境温度20℃-25℃,相对湿度在40%-50%,并调节磨粉机磨辊间距,以得到不同加工精度的小麦粉。每个样品在磨粉之前将磨空转30min,并清理,避免样品间相互交叉污染。
    2.2样品DON含量的检测
    2.2.1稀释提取物
    样品要充分混匀,取代表性粉末。称取5g粉末(过20目筛)样品至干净的50ml离心管中;加入体积为样品重量5倍的样品提取液;剧烈振荡1分钟,静置1分钟移取上清液1ml至小离心管,4000r/min离心40秒;移取上清液100µl至离心管加入1.0ml稀释缓冲溶液,密闭、混合、标记 ,得到稀释提取物。
    2.2.2二次稀释提取物  
   移取300µl的稀释提取物加入1.0ml稀释缓冲溶液,密闭、混匀、标记,得到二次稀释提取物。
    2.2.3检测步骤
    2.2.3.1检查孵育器的温度,确保其温度为45±1℃;
    2.2.3.2标记检测条,避免挤压样品室;
    2.2.3.3将检测条平放入ROSA孵育器中,小心撕开检测条的薄膜至指示线;
    2.2.3.4保持移液器竖直,缓慢移取300µl稀释提取液至样品室中,盖上孵育器的盖子,计时器自动开始计时,红灯闪烁;
    2.2.3.5孵育结束后,取出检测条,读数前使样品室一端向下放置,2分钟内读取结果。
 
    3 结果与分析
    表一不同加工精度小麦DON含量比较
 
    表二  小麦粉呕吐毒素的含量与小麦出粉率之间的关系
 
    3.1样品在检测前,在同环境条件下用DON标准样品进行检测,校准检测仪器。样品检测前要充分混匀,尽量降低误差。
    3.2从检测结果来看,呕吐毒素超标小麦经加工处理后小麦粉DON含量显著降低,出粉率控制在70%左右,DON含量降低40%-45%。
    3.3检测结果表明,呕吐毒素主要分布在小麦籽粒的外部与胚乳中,在小麦呕吐毒素含量在1500ppb以下的小麦,出粉率控制在65%以下,小麦粉的呕吐毒素含量是不超标的。
    3.4呕吐毒素污染是我国小麦主要的真菌毒素污染之一,特别在多雨的年份DON污染更为严重,由于小麦加工企业、收储企业、贸易商都对小麦DON含量作出限量,使毒素超标小麦很难出手,给当地农民带来很大经济损失。小麦呕吐毒素主要分布在籽粒外部,但现行的标准小麦与小麦粉的DON限量指标都是1000ppb, 对于作为原粮的小麦标准较为严格,DON含量在1000-1500ppb之间的小麦经过精细加工成的小麦粉是完全符合标准的。在以后的DON标准修订上是否能作出原粮和成品粮有区别的限量标准,更好的保护农民的利益。